Метод ВЭЖХ

Внедрение ВЭЖХ коренным образом изменило процедуру установления последовательности благодаря значительному снижению количества материала, необходимого для проведения анализа, так как метод ВЭЖХ на три порядка чувствительнее, чем, например, тонкослойная хроматография, и допускает количественную обработку результатов.

Во многих лабораториях достигнут предел обнаружения около 5 пмоль, обнаружение осуществляет по поглощению в УФ-области при 254—269 нм.

Задача разделения ФТГ-производных стандартных аминокислот весьма сложна из-за больших различий их полярности. Авторы одной из первых работ, проводимых в рассматриваемом направлении, решили эту проблему следующим образом: гидрофобные и гидрофильные производные аминокислот разделяются на различных колонках путем изократического элюирования.

Эта система до сих пор не потеряла своего значения, так как оборудование, используемое для разделения, очень несложно, а длительность анализа невелика. Несколькими годами позднее было впервые успешно проведено разделение производных всех стандартных аминокислот на одной колонке с применением градиентного элюирования.

Большая часть исследованных пептидов относится к группе природных. Эти пептиды очень часто обладают биологической активностью и могут участвовать в самых различных биохимических реакциях и выполнять другие функции.